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电纺益生菌功能化纳米复合材料的制备及其在小鼠模型的感染控制和皮肤烧伤愈合中的应用

2019-12-19   易丝帮

DOI: 10.1021/acsbiomaterials.9b01002

微生物区系的重要性,为利用微生物细胞作为药物治疗病理性疾病铺平了道路。本研究报道了用静电纺丝法制备益生菌(肠球菌QAUEM2808)功能化的聚乙烯醇/聚乙烯吡咯烷酮/甘油纳米复合支架。扫描电镜、傅里叶变换红外光谱和热重分析解决了活性复合材料的结构问题,并支持在整个生物支架膜的纳米结构(318±12 nm)纤维中包埋大肠杆菌。4周龄样品的保质期评估结果表明,与对应的生物分散体相比,生物菌落的益生菌存活数增加了2.78±0.10 log10菌落形成单位(CFU)。肿胀和拮抗评估表明,在模拟伤口液中生物菌落是可降解的,这是激活益生菌菌株对抗感染革兰氏阳性和革兰阴性病原菌的必要条件。在雄性BALB/c小鼠背上进行二度接触烧伤(n=30),小鼠随机分为阴性组(未处理)、阳性组(磺胺嘧啶银乳膏)、载体组(生物分散体+纳米)和实验性生物支架组(n=6/组),分别于烧伤后2、6、10、14天进行治疗。比较伤口闭合、组织病理学和创面微生物评价表明,生物支架加速了上皮化、胶原沉积、毛囊形成、抑制有害细菌,并提供了干扰的益处。尤其,益生菌活性生物支架膜可作为控制烧伤创面感染、加快创面愈合的新选择。

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图1.(A)从收集板上取下的支架膜,(B)控制烧伤后和燃烧装置的照片,(C)用无反应性医用胶带覆盖的伤口



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图2.(A)电纺支架的照片,(B)纳米支架的SEM图像,(C)生物支架的SEM图像,以及(D)生物支架的EDS显微照片



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图3. (A)生物支架的FTIR谱带,(B)生物支架的拉曼光谱,(C)基于TGA的生物支架的重量损失百分比,以及(D)涉及生物支架的化学示意图。



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图4. (A)比较生物支架和生物分散液中的存活的大肠杆菌计数(log10 CFU/g或mL)与TSA板上室温储存时间的关系(B)比较生物支架膜和生物分散液的体外抑制区(mm)电位与TSA板上金黄色葡萄球菌的储存时间的关系。 条形表示为平均值±标准差(n = 3)



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图5. 比较烧伤闭合百分比与烧伤后时间(第2、6、10、14和18天)和应用治疗的函数关系(A)未经处理,(B)生物分散,(C)Ag-SD, (D)纳米支架,和(E)生物支架。条形表示为平均值±SD(n = 3)。



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图6. 40倍和100倍放大下,H&E染色的皮肤组织切片的组织学显微照片比较(A)正常小鼠,(B)控制烧伤后的小鼠,烧伤后时间(10-d和18-d)和应用治疗(C)未经处理,(D)Ag-SD,(E)生物分散,(F)纳米支架和(G)生物支架。标有以下标记的插图; E,表皮; HF,毛囊; N,坏死; D,真皮; IC,炎性细胞; C,胶原蛋白; U,溃疡,M,肌肉组织; G,肉芽组织(n = 3)。



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