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Membranes:用于蛋白质纯化的电纺弱阴离子交换纤维膜

2020-04-07   易丝帮

DOI:10.3390/membranes10030039

用于蛋白质纯化的离子交换(IEX)膜和疏水相互作用色谱(HIC)通常用于去除在流通模式下运行的杂质和聚集体。当在结合和洗脱模式下操作分离蛋白质时,IEX和HIC也受到容量和回收率的限制。电纺纳米纤维膜的特点是高表面积体积比和高渗透性。在此,叔胺配体通过紫外线引发的聚合反应接枝到电纺聚砜(PSf)和聚丙烯腈(PAN)膜基底上。在适当的结合和洗脱缓冲条件下,测定了模型蛋白牛血清白蛋白(BSA)的静态和动态结合能力。对于功能化的电纺PAN膜,获得了约100 mg/mL量级的静态和动态结合能力,而功能化的电纺PSf膜的静态和动态结合容量约为200 mg/mL。PAN基膜的蛋白质回收率超过96%。但是,PSf基膜仅为56%。该工作表明,通过接枝聚合物配体对电纺膜进行表面修饰可以增强蛋白质的吸附,这是由于聚合物的表面积/体积比值的增加。

 

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图1.用甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)修饰(红色),再用二乙胺(DEA)(蓝色)修饰形成PSf-GMA-DEA膜后,PSf基膜(黑色)的FTIR光谱。


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图2.水解PAN膜(黑色)、用GMA修饰的PAN膜(红色)和用GMA-DEA修饰的膜(蓝色)的FTIR光谱。


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图3.未修饰PSf(a)、经7分钟紫外光修饰的PSf-GMA(b)、PSF-GMA-DEA(c)、未修饰mPAN(d)、经15分钟紫外光修饰的mPAN-GMA(e)和mPAN-GMA-DEA(f)的SEM形态。


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图4.(a)mPAN基膜,经3、6和15分钟紫外光聚合修饰mPAN-GMA-DEA膜的Zeta电位,(b)PSf基膜,经3、6和7分钟紫外光聚合修饰的PSf-GMA-DEA膜的Zeta电位。


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图5.电纺PSf和PAN膜的接枝度与紫外光聚合时间的关系。


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图6.在不同的紫外光聚合时间下,未修饰(原始)膜和修饰后的PSf和PAN膜的静态结合能力。误差棒代表3次测量的标准偏差。对于PAN,原始膜是在NaOH水解后。


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图7.使用经7分钟紫外光聚合的PSf-GMA-DEA(a),经15分钟紫外光聚合的mPAN-GMA-DEA(b)进行动态蛋白质结合的色谱图。


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