DOI:10.1016/j.colsurfb.2020.110994
石墨烯是碳原子构成的单层二维(2D)蜂窝状晶格结构的一种碳质材料。在本文中,研究者采用绿色合成方法,以葡萄糖为还原稳定剂生产还原型氧化石墨烯。研究人员还研究了用聚乙烯醇(PVA)作为(PG)支架增强葡萄糖还原氧化石墨烯(GRGO)(0-1.0wt%)电纺纳米纤维的制备,并在丙酮介质中与酸性戊二醛(GA)化学交联,以模拟细胞外基质(ECM)在皮肤组织工程中的应用。对这些PG支架的形态、机械强度、表面润湿性、热性能、血液相容性和生物相容性进行了评估。场发射扫描电子显微镜(FE-SEM)显示,PG支架中纳米纤维的厚度随GRGO浓度的增加而增加。X射线衍射、衰减全反射红外光谱和拉曼光谱表明,GRGO成功掺入到PVA纳米纤维基质中。随着PG支架中GRGO浓度的增加,抗张强度和断裂伸长率降低,而热性能提高。使用体外溶血法、CCD-986Sk(人皮肤成纤维细胞系)存活和增殖测定以及活/死细胞成像评估PG支架的生物学活性。结果表明PVA纳米纤维中的GRGO包合物引起了轻微的亲水-疏水性质转变。PG支架即使在GRGO负载为1.0wt%时也不会引起红细胞的溶血,与PG-0对照组相比,PG-1.0支架(GRGO负载为1.0wt%)与成纤维细胞具有极好的相容性,并且培养21天后代谢活性显著提高。DAPI染色和活/死成像分析表明,所有PG支架均可提高成纤维细胞的增殖和存活能力,这也表明该类支架在皮肤组织工程应用中的巨大潜力。
图1.A.GO和GRGO的紫外-可见吸收光谱;插图显示了水分散液(0.2 mg/ml)GO(之前)和GRGO(在90℃下用葡萄糖还原3小时后)。B.PG-0、0.05、0.1、0.3、0.5和1.0的紫外-可见光谱。(C)Gt、GO和GRGO以及(D)PG-0、0.05、0.1、0.3、0.5和1.0的X射线衍射图。
图2.(A)葡萄糖、GO、GRGO以及PG-0、0.05、0.1、0.3、0.5和1.0的ATR-IR光谱。(B)GO、GRGO以及PG-0、0.05、0.1、0.3、0.5和1.0的拉曼测量。(C)GRGO和PG支架的热重(TG)和(D)衍生TG(DTG)曲线。
图3.支架(A)PG-0、(B)PG-0.05、(C)PG-0.1、(D)PG-0.3、(E)PG-0.5和(F)PG-1.0的FE-SEM显微照片,在10 kV下拍摄,放大倍率为x10.0k(比例尺:5.0 µm)。
图4.(A)典型的应力-应变曲线,以及(B)PG支架断裂时的抗张强度和伸长率。
图5.(A)PG-0、0.05、0.1、0.3、0.5和1.0的体外溶血测定;插图显示了阳性对照(1%Triton X-00)的溶血百分比。结果表示为一式三份进行的实验的平均值±标准偏差。在含GRGO的PG支架和对照PG-0之间未发现显著性差异,以及(B)在不同PG支架上培养24、48或72 h的皮肤成纤维细胞活力。结果表示为一式三份进行的实验的平均值±标准偏差。使用学生t-检验测定含GRGO的PG支架和对照PG-0培养的成纤维细胞的代谢活性之间的差异(*P<0.05;**P<0.01;***P≤0.001;****P≤0.0001)。
图6.粘附在PG支架表面并增殖的成纤维细胞的FE-SEM图像,原始放大倍数分别为ⅹ1.0k、ⅹ3.0k和x10.0k;比例尺分别为50、10和5 µm。