DOI:10.1016/j.colsurfb.2020.111040
静电纺丝是构建用于骨再生的组织工程支架的常用技术。但是，纯电纺支架不能富集种子细胞或促进其成骨分化。组织工程支架的生物功能化是当前研究的热点。因此，在这项研究中，将骨髓间充质细胞（BM-MSC）特异性亲和力肽E7和骨形态发生蛋白2（BMP-2）模拟肽同时缀合到电纺支架的表面，以构建功能性PEB支架。PEB支架的表征显示，E7和BMP-2模拟肽均成功缀合到电纺支架表面上。在生物活性方面，由于E7和BMP-2模拟肽的共同递送，PEB支架可以同时促进BM-MSC的粘附和成骨分化，与其他三种支架相比具有明显的优越性。因此，PEB支架为骨组织工程支架的构建提供了新的思路。
图1.支架的表面特性。（IA）通过SEM观察到的PP支架的纤维结构。纤维形态是光滑且均匀的，为纳米级材料。（IB）均一的绿色荧光表明FITC标记的E7肽均匀地缀合在PE支架上。（IC）均一的红色荧光表明罗丹明标记的BMP-2模拟肽均匀地缀合在PB支架上。（ID）PEB支架的图像。D，将FITC标记的E7缀合到PEB支架上。E，将罗丹明标记的BMP-2模拟肽缀合到PEB支架上。F，PEB支架同时包含E7肽和BMP-2模拟肽。绿色，FITC标记的E7；红色，罗丹明标记的BMP-2模拟肽（比例尺=100μm）。II-III，XPS分析以验证肽和电纺支架之间的结合状态。II，不同支架的代表性XPS光谱。III，每个支架的表面元素含量。在PB、PE和PEB支架中发现了Na或N元素，但在PP支架中未发现。
图2.支架的物理特征。I，使用水接触角（WCA）分析亲水性。PP支架的WCA明显高于PB、PE和PEB支架。II–III，机械特性分析。II，抗张强度。III，断裂伸长率。
图3.支架的生物相容性分析。I，在每个支架中培养BM-MSC后的CCK-8测定结果。II，孵育24小时后，用FITC-鬼笔环肽染色的BM-MSC的细胞骨架形态。与PP和PB支架相比，PE和PEB支架中的BM-MSC表现出更好的铺展形态（比例尺=50μm）。III，在每个支架中培养BM-MSC 21天后的DNA含量测定。与每个时间点的PP和PB组相比，＃p<0.05；与每个时间点的PP和PB组相比，*p<0.05。
图4.支架上BM-MSC的成骨分化。I，通过RT-qPCR分析每个支架中BM-MSC的成骨基因表达。II-V，支架中成骨标记蛋白的免疫荧光染色。II，OPN的免疫荧光染色。III，OPN荧光强度的定量分析。IV，OCN的免疫荧光染色。V，OCN荧光强度的定量分析。PEB支架中的OPN和OCN蛋白含量明显高于PP、PB和PE支架。 与PP、PB和PE组相比，*p<0.05。（比例尺=50μm）
